新冠病毒核酸检验测试假阴性假阳性问题探索及解决方案

  降解，核算检验测试试剂盒的快速审批入市，质量参差不齐等等，这些环节都可能会引起假阴性的发生。同时各环节操作的不规范，还有可能会出现假阳性的发生。

  PCR各品牌，各型号的对核酸检验测试试剂的适应性的讨论就不多见了，本文就病毒核酸提取、qPCR检测、体系加样等环节，在耶拿公司产品的基础上提出了一系列解决方案， 供大家参考。

  常规磁棒法全自动核酸提取仪因磁棒磁力下降导致磁珠残留，进而导致交叉污染出现假阳性/假阴性结果。

  德国耶拿公司InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪，Cybio-Felix全能型工作站将人们从繁琐的核酸提取纯化过程中解放出来，大幅度的提升了工作效率和产物质量。您只需要加入样本，选择相应的提取程序，按下“开始”即可轻松获得纯净的核酸。

  l耶拿公司的C16 Touch核酸提取仪，最大上样体积可到600μL，加大上样量能够得到更多核酸，降低假阴性的产生

  l产物无磁珠残留，有很大效果预防交叉污染，降低假阳性；提取结果重复性、均一性更好

  年耶拿公司发明了专利性的核酸提取技术DC-Technology（双缓冲液技术），采用独特的裂解缓冲液和新型的结合缓冲液，无需使用高盐结合，提高核酸提取得率，以及更为完整的核酸片段，降低假阴性可能。

  2016年耶拿公司又发明了专利性的新一代提取技术Smart Extraction，该技术打破常规核酸提取需要借助介质吸附核酸的传统，提取过程无需酚/氯仿、无需离子交换、无需离心柱、无需硅胶膜、无需磁珠，仅需tip上下吹打就可以完成。提取得到的核酸得率高、完整度高，纯度好，降低假阴性的可能性。

  PCR过程中的检测灵敏度、特异性、重复可靠性就成为了获取高质量检测结果最至关重要的因素了。

  PCR仪温度控制的准确性、均一性不高，结果扩增效率较低或者批次内和批次间的重复性不佳，导致假阴性结果；

  德国耶拿公司qTOWER3系列荧光定量PCR仪，以其卓越的温控系统带来快速稳定的实验结果，先进的光学检测系统带来高灵敏度的检测。

  l镀金纯银样品槽，采用热传递性非常好的银质材料，快速的升降温速率能够加快实验速度，缩短实验时间，提高实验效率。准确的温度控制带来优异的温度均一性，进而带来各样品间以及各批次间稳定的定量PCR扩增结果。

  l采用蓝色、绿色、红色、白色四个高强度长寿命LED固态光源，确保在整个光谱检验测试范围内都有很强的激发光强，有利于较弱信号的采集，来提升实验检验测试灵敏度，减少假阴性可能。LED光源寿命长，免维护，节约后续的使用成本。

  l采用定量PCR仪上最新一代的通道式光电倍增管（CPM）检测器，大大降低背景噪音信号，检验测试灵敏度比CCD或PMT（普通光电倍增管）高，提高检测灵敏度，减少假阴性可能。

  在如今的新时代，各类全自动液体处理工作站已经在全球各个生命科学、疾病药物诊断研发、政府机构的高通量检验测试领域中得到普遍的使用。德国耶拿公司建议除了前面提到的核酸提取步骤能够使用全自动液体处理工作站高效的完成之外，PCR的体系构建等工作也能够使用类似的方法来解决。

  德国耶拿公司Cybio-Felix全能型液体处理工作站，可自动完成定量PCR反应中涉及到的各类预混液、引物、模板、去离子水 等的加样，代替手工快速、准确、高效地进行定量PCR反应体系的构建，适用于各类PCR体系及成品试剂盒的液体处理。

  PCR体系构建快速高效，提高检测效率，让更多的疑似患者能够尽快明确：可在半小时内实现整版PCR体系构建；若采用整板的预混Mix，则完成速度更快；

  tip，避免移液头污染；UV灯灭菌，避免批间污染。且PCR体系构建速度较快能减少模板中DNA的挥发，减少系统内核酸气溶胶的浓度大幅度减少假阳性的发生概率；

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